
贝科新肽(图)-荧光原位杂交-原位杂交
将32P标记的双链DNA探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间,盛滤膜的容器应盖严,以防液体蒸发。杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×SSC和0.1%SDS溶液中,轻轻振摇5分钟,并将滤膜至少翻转一次。重复洗一次,同时应避免膜干涸。68℃用300-500ml1×SSC和0.1%SDS溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景很高或实验要求严格的洗膜条件,原位杂交,可用300-500ml0.2×SSC和0.1%SDS的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。在ISHH,整个实验周期是比较长的,实验程序也比较繁杂,而杂交在ISHH整个实验中可被认为是“短兵相接”的一步。杂交前的一切准备工作如增加组织通透性都是为了在杂交这一步骤中核酸探针能进入细胞或组织与其内的靶核苷酸相结合。因此,杂交是ISHH中关键的而且是重要的一个环节。杂交是将杂交液滴于切片组织上,加盖硅化的盖玻片,防止孵育过程中的高温(50℃左右)导致杂交液的蒸发。为保证杂交所需的湿润环境,可将其放在盛有少量5×SSC或2×SSC(standardsalinecitrate,原位杂交检测,SSC)溶液的硬塑料盒中进行孵育。杂交液的成分和预杂交液基本相同,所不同的是加入了标记的核酸探针和硫酸葡聚糖。原位杂交是一项非常重要的生物技术,可以用于研究基因表达和调控,检测基因变异和染色体异常,监测细胞生长和凋亡,荧光原位杂交,以及识别特定的细胞类型或组织。然而,它需要特殊的操作技术和设备,以及严格的对照实验才能获得可靠的结果。原位杂交是一项非常重要的生物技术,植物原位杂交,可以用于研究基因表达和调控,检测基因变异和染色体异常,监测细胞生长和凋亡,以及识别特定的细胞类型或组织。然而,它需要特殊的操作技术和设备,以及严格的对照实验才能获得可靠的结果。贝科新肽(图)-荧光原位杂交-原位杂交由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的化学试剂等行业积累了大批忠诚的客户。贝科新肽带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)