将32P标记的双链DNA探针于100℃加热5分钟，迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间，盛滤膜的容器应盖严，以防液体蒸发。杂交结束后，去除杂交液，立即于室温把滤膜放入大体积（300-500ml）的2×SSC和0.1%SDS溶液中，轻轻振摇5分钟，并将滤膜至少翻转一次。重复洗一次，同时应避免膜干涸。68℃用300-500ml1×SSC和0.1%SDS溶液洗膜两次，每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景很高或实验要求严格的洗膜条件，可用300-500ml0.2×SSC和0.1%SDS的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。原位杂交第二天1.1）将探针回收，放于－20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。3）置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。4）置换0.2XSSCT1ml，荧光原位杂交技术，60℃，放置30分钟，重复一次。2.1）用MABT洗两次，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。2）室温下加1ml1：2：7溶液，时间为一小时。3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，4C冰箱过夜。原位杂交技术可以应用于以下场景：组织中病毒DNA/RNA的检测和定位。例如，可以用于检测EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA等。癌基因、抑癌基因及其他各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。检测染色体的变化，如染色体数量异常和染色体易位等。在植物基因组研究中的应用。例如，通过与特定基因序列的探针进行杂交，可以在植物染色体上定位到目标基因的位置，进而构建遗传图谱，为植物育种和基因组研究提供基础数据。武汉贝科新肽(多图)-荧光原位杂交技术由武汉贝科新肽科技有限公司提供。“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”选择武汉贝科新肽科技有限公司，公司位于：湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号，多年来，贝科新肽坚持为客户提供好的服务，联系人：夏先生。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。贝科新肽期待成为您的长期合作伙伴！)