植物原位杂交-武汉贝科新肽-原位杂交
以菌落原位杂交为例:对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落(100-200)进行筛选时,植物原位杂交,可采用该方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张纤维素滤膜上。经培养一段时间后,荧光原位杂交,对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。将少数菌落转移到纤维素滤膜上(1)在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。(2)用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上,原位杂交,再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种(或打点)。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后,在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。(3)倒置平板,染色体荧光原位杂交,于37℃培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。(4)用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂,在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。(5)用Parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,直至获得杂交反应的结果。(6)裂解细菌,按本段下面所述方法,使释放的DNA结合于纤维素滤膜。生物领域应用原位杂交技术的例子:物种进化与系统发生学研究:在物种进化与系统发生学研究中,原位杂交技术可以用于检测物种之间的亲缘关系和进化历程。例如,可以比较不同物种之间特定基因序列的差异,进而研究它们的亲缘关系和进化历程。原位杂交技术在基因表达和调控、细胞分化与发育、研究和物种进化与系统发生学等领域都有广泛的应用价值,为深入探究生命现象、促进生物技术的发展提供了有力的技术支持。DNA探针为原位杂交提供较高的灵敏度。与RNA探针相比,DNA探针与靶mRNA分子的杂交强度较弱,因此在杂交后的洗涤中不应使用甲醛。探针特异性至关重要。如果已知细胞中mRNA或DNA的确切核苷酸序列,则可据此设计高度的互补探针。如果超过5%的碱基对不互补,那么探针只能与靶序列发生轻度杂交。这意味着,探针更容易在洗涤和检测步骤中被洗去,可能无法正确检测。植物原位杂交-武汉贝科新肽-原位杂交由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工队伍,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。贝科新肽——您可信赖的朋友,公司地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号,联系人:夏先生。)