为什么要提供GFP空载的对照图片？（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。（2）作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。拍摄时为什么有明场通道？（1）显示细胞状态，有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态，变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。（2）显示荧光确实是细胞内蛋白表达的，而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。理解复杂生理过程：细胞内的各种生理过程是由不同亚细胞位置的蛋白质协同作用完成的。亚细胞定位研究可以帮助我们更好地理解这些复杂生理过程的机制。设计靶标：许多的作用靶点是特定亚细胞位置的蛋白质。准确确定蛋白质的亚细胞定位可以为设计提供有价值的靶标信息。亚细胞定位的研究方法：融合报告基因定位法：将待研究的蛋白质与报告基因融合，通过观察报告基因的表达位置来确定蛋白质的亚细胞定位。常用的报告基因有绿色荧光蛋白（GFP）等。免疫组织化学定位法：利用特异性与蛋白质结合，通过免疫组织化学技术检测蛋白质在细胞内的位置。蛋白质组学定位技术：通过对细胞内不同亚细胞组分的蛋白质进行分离和鉴定，确定蛋白质的亚细胞定位。共分离标记酶辅助定位法：利用与特定亚细胞结构相关的标记酶，通过共分离实验确定蛋白质的亚细胞定位。生物信息学预测：基于蛋白质的氨基酸序列等信息，利用计算机算法预测蛋白质的亚细胞定位。蛋白质序列特征：利用改进型伪氨基酸组成法（PseAAC）、伪位置特异性得分矩阵法（PsePSSM）和三联体编码法（CT）对蛋白质序列进行特征提取，并将这三种方法得到的特征向量进行融合，以得到一个全新的蛋白质序列特征表达模型，然后输入到堆栈式降噪自编码器（SDAE）深度网络里自动学习更有效的特征表示，选用Softmax回归分类器进行亚细胞的分类预测，可有效提高蛋白质亚细胞定位预测的准确性。利用PSI-BLAST工具搜索蛋白质序列，提取位点特异性谱中的位点特异性得分矩阵作为蛋白质的一类特征，并计算4等分序列的氨基酸含量以及1～7阶二肽含量作为另外两类特征，荧光定量，由这三类特征一共得到蛋白质序列的12个特征向量。通过设计一个简单加权函数对各类特征向量加权处理，作为神经网络预测器的输入，可提高蛋白质亚细胞定位预测的精度。荧光定量-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念，拥有一支高素质的员工队伍，力求提供更好的产品和服务回馈社会，并欢迎广大新老客户光临惠顾，真诚合作、共创美好未来。贝科新肽——您可信赖的朋友，公司地址：湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号，联系人：夏先生。)