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意义免yi组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性的原发部位;(3)对某类进行进一步的病理分型;(4)软组织的一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行组化研究对软组织的诊断是不可缺少的;(5)发现微小转移灶,有助于临床方案的确定,包括手术范围的确定。(6)为临床提供方案的选择。将少数菌落转移到纤维素滤膜上(1)在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。(2)用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上,再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种(或打点)。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后,在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。(3)倒置平板,于37℃培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。(4)用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂,在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。(5)用Parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,直至获得杂交反应的结果。(6)裂解细菌,按本段下面所述方法,使释放的DNA结合于纤维素滤膜。既要充分保留被测核酸,(特别是RNA)不被降解,又要尽可能维持原有组织或细胞的形态结构。步骤:基本与免1疫组织化学技术相似,即组织要求新鲜和迅速投入固定液。固定液为4%多聚甲醛/0.1MPBS(PH7.0-7.6),植物原位杂交测试服务,含有1/1000DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。取材过程中避免手指、唾液和未经RNA酶抑制处理的器具接触标本。冷冻切片以厚5~30um佳,40℃烤箱内干燥2小时后储存在-80℃超低温冰箱,在-20℃可保存2~3周,在-70℃可保存数月之久。植物原位杂交测试服务-科锐诺(在线咨询)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。行路致远,砥砺前行。武汉科锐诺生物科技有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴,更矢志成为技术合作具有竞争力的企业,与您一起飞跃,共同成功!)
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