武汉科锐诺(多图)-植物基因组原位杂交技术服务
荧光原位杂交技(fish)原理:是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交,通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。荧光原位杂交技(fish)实验步骤:1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(DEPC水配制)中固定2-12h。2、脱水:组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡,包埋。3、切片:石蜡经切片机切片,摊片机捞片,62°烤箱烤片2h。4、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲1苯Ⅰ15min-二甲1苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min,风干,DEPC水浸泡。5、消化:根据组织固定时间长短,切片于修复液中煮沸10分钟,自然冷却。后基因笔画圈,根据不同组织不同指标特性,滴加蛋白酶K(20ug/ml)37°消化20min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。基因芯片又称DNA芯片或DNA微阵列。其原理是在固体载体(硅片、玻片、硝1酸纤维素膜)上按照特定的排列方式集成大量已知DNA/cDNA片段,形成DNA/cDNA微矩阵。基因芯片技术是一门新兴的技术,由于该技术能在一次实验中自动、快速、敏感地同时检测数千条序列,而且获得的序列信息高度特异、稳定。根据探针类型分为DNA芯片和cDNA芯片,前者用于检测基因突变,实现肿1瘤早期诊断、判断预后及治1疗;后者用于检测基因表达,对肿1瘤进行发现性分类和预测性分类。水稻种子是人类重要的食物来源,其发育涉及一个复杂的调控网络,其中转录因子发挥了关键作用。MADS转录因子家族成员是植物花器1官发育的重要调控因子,已有的研究表明,几乎所有的水稻MADS基因都在种子中表达,但对MADS家族成员参与水稻种子发育调控的研究结果仍比较少。在这项研究中,研究组基于前期的表达谱研究基础,分析得到了一个在水稻生殖发育阶段优先表达的转录因子MADS29。细致分析表明,MADS29在花药、胚珠和种子中均表达,植物基因组原位杂交技术服务,且在受精后的母体组织表达量高。MADS29的反义转1基因植株呈现种子皱缩、淀粉粒形态异常、灌浆速率下降等表型。通过解剖学切片、末端转移酶标记实验和全基因组表达谱芯片分析等,研究人员证明了MADS29通过调控程序化死1亡(PCD)过程促进珠心细胞和珠心突起处的降解。进一步的体外凝胶阻滞实验显示,MADS29能够通过直接结合程序化死1亡相关基因的启动子区域而调控其表达,进而影响胚乳发育。武汉科锐诺(多图)-植物基因组原位杂交技术服务由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司拥有很好的服务与产品,不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员,点击页面的商盟客服图标,可以直接与我们客服人员对话,愿我们今后的合作愉快!)