整体荧光原位杂交-贝科新肽(推荐商家)
荧光原位杂交(FISH)技术具有以下优点:高特异性:荧光探针的合成是定向的,保证了杂交过程的特异性,可以有效地降低非特异性杂交和背景干扰。高灵敏度:荧光信号的检测比性信号的检测更灵敏,可以检测出低拷贝数的DNA序列,甚至可以检测单个基因序列。快速简便:FISH技术操作简便,杂交过程可以在数小时或数天内完成,而且不需要过于复杂的设备,便于在实验室开展。菌落的裂解及DNA结合于纤维素滤膜(1)在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/LNaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。(2)用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/LNaOH重复步骤(1)。(3)吸干滤膜,整体荧光原位杂交,将滤膜转移到新的带有1mol/LTris·Cl(pH7.4)的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜,再重复一次该步骤。(4)吸干滤膜,把它转移到有1.5mol/LNaCl、0.5mol/LTris·Cl(pH7.4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。(5)将滤膜夹在两张干的滤纸之间,在真空烤箱中于80℃干烤2小时,固定DNA。(6)将固定在膜上的DNA与32P标记的RNA进行杂交。预杂交1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。2)用等体积的HYB+取代HYB-。3)60℃水浴,预杂交4小时以上。杂交1)吸去预杂交的HYB+,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..2)60℃温浴过夜。注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。整体荧光原位杂交-贝科新肽(推荐商家)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”选择武汉贝科新肽科技有限公司,公司位于:武汉市洪山区雄楚大道339号林业局林木种苗管理总站科技楼6楼606,多年来,贝科新肽坚持为客户提供好的服务,联系人:夏先生。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。贝科新肽期待成为您的长期合作伙伴!)
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