随着外泌体研究的不断升温，电镜技术也在持续优化和创新，从传统的负染成像到冷冻成像、3D重构，从单一的形态观察到结构与功能的联合分析，电镜技术为外泌体的研究提供了越来越强大的技术支撑。然而，外泌体电镜研究仍面临诸多挑战，如样本制备复杂、易产生伪影、成像结果解读困难、技术流程未标准化等，这些问题严重影响了研究结果的准确性和可重复性，限制了外泌体基础研究向临床应用的转化。因此，系统梳理外泌体电镜技术的原理、流程、应用及现存问题，对于推动外泌体研究的规范化、标准化发展，挖掘外泌体的生物学功能及临床应用价值具有重要的理论意义和实践价值。本文结合近年来的研究进展，对上述内容进行、详细的阐述，为相关领域研究人员提供参考。外泌体（Exosome）是一类由细胞分泌的纳米级脂质双层膜囊泡，直径约30~150nm，广泛存在于血液、尿液、牛奶等各类体液中，几乎所有细胞类型均可分泌外泌体。作为细胞间通讯的“纳米信使”，外泌体携带母体细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、miRNA、lncRNA等）、脂质等生物活性物质，能够反映细胞的生理与病理状态，在疾病发展、细胞信号传导、免疫调节等过程中发挥关键作用，同时也为疾病诊断、监测及递送提供了全新的研究方向与技术靶点。自1987年Johnstone正式命名“Exosome”以来，外泌体的研究热度持续攀升，而外泌体检测技术的突破的是推动其从基础研究走向临床应用的支撑，本文将系统梳理外泌体检测的技术、研究进展、临床应用及现存挑战与展望。尽管外泌体检测技术取得了显著进展，但目前仍面临诸多挑战，制约其临床转化与普及：一是检测技术的标准化不足，不同实验室采用的分离纯化方法、检测技术与判定标准存在差异，导致检测结果的重复性与可比性较差，如不同技术检测的外泌体粒径、浓度存在偏差，标志物检测的阈值尚未统一，ISEV的鉴定标准虽被广泛遵循，但临床应用中的标准化流程仍需完善；二是检测灵敏度与特异性有待进一步提升，体液中外泌体浓度较低，且存在大量相似粒径的杂质颗粒，传统技术难以实现低浓度外泌体的检测，部分标志物在不同疾病中存在交叉表达，影响检测特异性，外泌体提取，尤其在疾病早期，外泌体标志物的异常表达水平较低，进一步增加了检测难度外泌体提取-贝科新肽(推荐商家)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念，拥有一支高素质的员工队伍，力求提供更好的产品和服务回馈社会，并欢迎广大新老客户光临惠顾，真诚合作、共创美好未来。贝科新肽——您可信赖的朋友，公司地址：武汉市洪山区雄楚大道339号林业局林木种苗管理总站科技楼6楼606，联系人：夏先生。)